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光损伤后人视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子A及其受体的表达
发布时间:2012-08-14      来源:
目的 观察光损伤后人视网膜色素上皮(RPE)细胞血管内皮生长因子A(VEGF-A)及其受体可溶性fm样酪氨酸激酶受体(sFlt-1)和包含激酶植入区域受体(KDR)的表达。方法 体外培养人RPE细胞,取第8~12代生长良好的传代细胞用于实验。将同代细胞随机分为对照组和光损伤组。以18 W冷白色荧光灯作为光源,自制光照器。采用双层高压消毒锡纸包裹对照组细胞,与光损伤组细胞一同置于自制光照器下,控制光照强度在(2200±300) Lux,持续光照12 h建立光损伤模型。于光损伤后0、6、12、24 h终止培养,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测VEGF-A、sFlt-1及KDR 的mRNA及蛋白表达。结果 光损伤组VEGF-A mRNA及蛋白表达在光损伤后6 h时明显增加,12 h时达到高峰,明显高于对照组(t=2.74,2.93;P<0.05),随后降低。sFlt-1的mRNA及蛋白表达在光损伤后12 h达到高峰,明显高于对照组(t=4.32,P<0.01);24 h时明显低于对照组(t=2.41,P<0.05)。KDR的mRNA及蛋白表达在光损伤后6、12 h时较对照组无明显变化(t=1.84,P>0.05),24 h时高于对照组(t=2.89,P<0.05)。 〖HTH〗结论光损伤后6、12 h时,RPE细胞VEGF-A及sFlt-1的表达明显增高,KDR的表达相对稳定。光损伤后24 h时,RPE细胞VEGF-A及sFlt-1的表达降低,KDR的表达增高。
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